冻存管的使用方法和注意事项改

冻存管又称菌种保存管、磁珠保存管、磁珠冻存管。微生物实验室常用的菌种保存方法有牛奶法、甘油法、斜面法等。复杂程度各异，效果也差别很大。目前国内的大多数实验室都是实验人员自行制作菌种保存管，这不仅增大了工作强度，并且由于各种条件的限制，菌种保存效果不能总是令人满意。所以，这就需要掌握好冻存管的使用方法和一些注意事项，这样才能起到很大的作用。

一、使用方法

1、使用冻存管储存样本时，严格要求应把冻存管放入液氮的气相层或冰箱中保存。如果冻存管储存于液氮液体中，液氮有一定几率会渗入冻存管内部，复苏时液氮气化导致管内外压力不平衡，这样极易造成冻存管的炸裂，并具有生物危害性。

2、操作冻存管复苏，全程使用安全防护设备，建议穿实验服、戴棉质手套且在安全的实验台上进行操作。条件允许情况下，请佩戴护目镜或防护面罩。由于夏季室内温度会高于冬季，请格外小心。

3、冻存细胞储存过程中，冻存管的冷冻温度须均匀。不均匀的受冻将会导致冰塞的产生，冰塞会抑制两侧的液体温度传递进而产生危险的高压力并导致冻存管受损。

4、冻存的样本量不要超过冻存管要求的最大工作体积。

二、注意事项

1、冻存管保存环境

未经使用的冻存管可在室温或2-8℃保存12个月；已经接种的冻存管在-20℃保存，12个月内可有良好的菌株保存效果；已经接种的冻存管在-80℃保存，24个月内可有良好的菌株保存效果。

2、冻存管保存时间

未经使用的冻存管可在室温或2-8℃保存；已经接种的冻存管在-20℃或-80℃保存。

3、冻存管的使用步骤

从细菌纯培养物中挑取新鲜培养物配成大约为3-4麦氏比浊度的菌悬液接种与菌种保存管中；拧紧保存管，来回颠倒4-5次使细菌乳化，不能旋摇；把保存管放入冰箱保存（-20℃--70℃

三、重要提醒

1、需在生物安全柜中操作，确保操作的无菌，确保菌株不被污染。

2、冻存管中小瓷珠的颜色可能有所不同，这不代表任何产品功能的不同，只是方便用户进行细菌编码、标记。

3、在接种之前有如下情况产生，该冻存管不得使用：

a. 瓶子有漏液情况发生。

b. 冻存管内的冻存保护液混浊（说明已经被污染）。

c. 超过有效保存期。

4、小瓷珠一旦从冻存管中取出，不得以任何原因再放回冻存管中。

5、当丢弃使用过的或部分使用过的冻存管时，应注意生物危害的预防。

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